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Analyse von Ceramidmetaboliten mit genregulierenden Eigenschaften in UV-bestrahlten Hautzellen

von Dr. Ati

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Statistik und Sichtungsnachweis dieser Seite findet sich am Artikelende
[1.] Ati/Fragment 020 01 - Diskussion
Zuletzt bearbeitet: 2014-09-20 15:53:32 Hindemith
Ati, Fragment, Gesichtet, Grether-Beck 2005, SMWFragment, Schutzlevel sysop, Verschleierung

Typus
Verschleierung
Bearbeiter
SleepyHollow02
Gesichtet
Yes.png
Untersuchte Arbeit:
Seite: 20, Zeilen: 1-8, 12-31
Quelle: Grether-Beck 2005
Seite(n): 13, 65, 67, Zeilen: 13: 11ff 65: 3ff; 67: 4ff
1.5 Stand der Forschung zu Beginn der Arbeit

Neben der Induktion von DNS-Schäden - insbesondere Thymindimeren - wurde schon in den 90iger Jahren die Aktivierung von Rezeptortyrosinkinasen, die Stabilisierung von p53 und die Aktivierung von Transkriptionsfaktoren wie AP1 oder NFκB als Elemente von UVC- und/oder UVB-induzierten Signaltransduktionskaskaden diskutiert [Schreck et al 1992, Herrlich et al 1994, Holbrook und Fornace 1994, Herrlich et al 1997]. Zudem konnte in enukleierten Zellen sowohl für UVB [Devary et al 1993] als auch für UVA [Vile et al 1995] eine Aktivierung von NFκB im Zytosol nachgewiesen werden.

[...] Experimente mit Reportergenkonstrukten, die eine Deletion der mutmaßlichen AP2-Bindestelle im 5'-regulatorischen Bereich des menschlichen ICAM-1 Promotors trugen, zeigten, dass der Verlust der AP2-Bindestelle nicht jedoch ein Verlust der NFκB-Bindestelle mit einem Verlust der UVA-induzierten Expression von ICAM-1 einhergeht. Zudem konnte nach UVA-Bestrahlung eine Aktivierung von AP2 in nuklearen Extrakten bestrahlter Zellen nachgewiesen werden. Kinetische Studien an diesen Zellen zeigten einen biphasischen Verlauf sowohl für die UVA-induzierten Aktivierung von AP2 wie der UVA-induzierte ICAM-1 Expression. Beide Effekte glichen sich in ihrem zeitlichen Muster. Die Deletion der AP2-Bindestelle verhinderte zwar in den Promotorkonstrukten die Aktivierung des Reportergens durch UVA-Bestrahlung, nicht jedoch die Aktivierung durch UVB-Strahlung. Die mutmaßliche AP2-Bindestelle stellt also den durch UVA gesteuerten Schalter des menschlichen ICAM-1 Gens dar. Dieser Schalter ist spezifisch für Strahlung aus dem UVA-Bereich und die Aktivierung des ICAM-1 Promotors durch UVA- und UVB-Strahlung erfolgt über verschiedene Regelwege.

Singulettsauerstoff ist ein wichtiges biochemisches Zwischenprodukt in verschiedenen biologischen Prozessen [Tyrrell 1996; Grether-Beck et al 1996, 1997; Ryter und Tyrrell 1998; Klotz et al 2000]. Da bisher keine direkten Methoden existieren, um Singulettsauerstoff in UVA-bestrahlten Zellen nachzuweisen, muss der Nachweis seiner Beteiligung an diesen Signalwegen immer indirekter Natur sein und basiert auf indirekten Methoden wie etwa dem Gebrauch von Substanzen, die Singulettsauerstoff auslöschen oder seine Halblebenszeit verlängern und dem Einsatz von Singulettsauerstoff generierenden Systemen.

1.4 Stand der Forschung zu Beginn der Arbeit

Neben der Induktion von DNS-Schäden - insbesondere Thymindimeren - wurde zu Beginn dieser Arbeiten auch die Aktivierung von Rezeptortyrosinkinasen, die Stabilisierung von p53 und die Aktivierung von Transkriptionsfaktoren wie AP1 oder NFκB als Elemente von UVC- und/oder UVB-induzierten Signaltranduktionskaskaden diskutiert (Schreck et al., 1992; Herrlich et al., 1994; Holbrook & Fornace, 1994; Herrlich et al., 1997). Zudem konnte in enukleierten Zellen sowohl für UVB (Devary et al, 1993) als auch für UVA (Vile et al, 1995) eine Aktivierung von NFκB im Zytosol nachgewiesen werden.

[Seite 65]

Experimente mit Reportergenkonstrukten, die eine Deletion der mutmaßlichen AP2-Bindestelle im 5´-regulatorischen Bereich des menschlichen ICAM-1 Promotors trugen, zeigten, dass der Verlust der Bindestelle mit einem Verlust der UVA-induzierten Antwort der Expression von ICAM-1 einhergeht. Zudem konnte nach UVA-Bestrahlung eine Aktivierung von AP2 in nuklearen Extrakten bestrahlter Zellen nachgewiesen werden. Kinetische Studien an diesen Zellen zeigten einen biphasischen Verlauf sowohl für die UVA-induzierten Aktivierung von AP2 wie der UVA-induzierte ICAM-1 Expression. Beide Effekte glichen sich in ihrem zeitlichen Muster. Die Deletion der AP2-Bindestelle verhinderte zwar in den Promotorkonstrukten die Aktivierung des Reportergens durch UVA-Bestrahlung, nicht jedoch die Aktivierung durch UVB-Strahlung. Die mutmaßliche AP2-Bindestelle stellt also den durch UVA gesteuerten Schalter des menschlichen ICAM-1 Gens dar. Dieser Schalter ist spezifisch für Strahlung aus dem UVA-Bereich und die Aktivierung des ICAM-1 Promotor durch UVA- und UVB-Strahlung erfolgt über verschiedene Regelwege.

[Seite 67]

Singulettsauerstoff ist ein wichtiges biochemisches Zwischenprodukt in verschiedenen biologischen Prozessen (Kanofsky, 1989). Singulettsauerstoff wurde als primärer Effektor für die UVA-induzierte transkriptionelle Aktivierung von Hämoxygenase 1 (Basu-Modak & Tyrrell, 1993) und Matrixmetalloproteinase-1 (Scharffetter-Kochanek et al., 1993; Wlaschek et al., 1995) identifiziert. Es existieren bisher keine direkten Methoden, um Singulettsauerstoff in UVA-bestrahlten Zellen nachzuweisen. Hinweise auf die Beteiligung von Singulettsauerstoff an der Induktion von Genexpression müssen deshalb immer indirekter Natur sein und basieren auf indirekten Methoden wie etwa dem Gebrauch von Substanzen, die Singulettsauerstoff auslöschen oder seine Halblebenszeit verlängern und dem Einsatz von Singulettsauerstoff generierenden Systemen (Basu- Modak & Tyrrell, 1993; Scharffetter-Kochanek et al., 1993; Wlaschek et al., 1995).

Anmerkungen

Kein Hinweis auf die Quelle.

Sichter
(SleepyHollow02), Hindemith


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Letzte Bearbeitung dieser Seite: durch Benutzer:Hindemith, Zeitstempel: 20140920155403

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